探討位置2'取代基對核酸三螺旋穩定度的影響和核酸探針的設計與物性研究

文化大學機構典藏 CCUR > 理工學院 > 理學院 > 化學系所 > 研究計畫 > Item 987654321/1150

請使用永久網址來引用或連結此文件: https://irlib.pccu.edu.tw/handle/987654321/1150

題名:	探討位置2'取代基對核酸三螺旋穩定度的影響和核酸探針的設計與物性研究
作者:	靳宗玫
關鍵詞:	核酸三螺旋結構髮夾式核酸探針螢光核酸探針親和性專一性位置-2'化學修飾的尿甘衍生物
日期:	2004
上傳時間:	2009-08-05 10:40:42 (UTC+8)
摘要:	基因治療預期將是二十一世紀醫療科學最重要的課題之一，其相關的生物科技、基因器材與基因藥物試劑的開發，亦將成為本世紀新興重點工業。核酸序列5'-d-(TC)n 和 5'-d-(AG)n 為基因中常出現的序列，我們針對此二基因序列設計與發展髮夾式核酸探針 5'-d-(AG)nT4(CT)n 和5'-d-(TC)nT4(CT)n。核酸探針自身的穩定度（抗酵素降解作用）、檢測靈敏度、及其對目標核酸鏈的親和性與辨識專一性，都是決定核酸探針效益的重要考量。在本計畫中即分成幾個項目進行研究，期能發展出兼具多項優點之核酸探針。 I. 髮夾式核酸探針的研究－反基因與反意義試劑的研發及溶液環境對探針效能的影響。物性研究系列核酸探針5'-d-(AG)nT4(CT)n 與目標核酸鏈（雙螺旋DNA 或單股 RNA）相互作用的情形，探討各實驗因子對其親和性與辨識專一性的影響，如：髮夾長度、溫度、溶液酸鹼度、緩衝溶液種類、陽離子種類與濃度等。 II. 發展生成核酸三螺旋結構的螢光核酸探針。將寡核酸鏈鍵結螢光物質（F）或可吸收螢光能量的抑制物（Q），運用靈敏的螢光訊號強弱變化或螢光能量傳遞（FRET）現象，篩檢目標核酸鏈和探索生物分子間交互作用的熱力學與動力學行為。螢光核酸探針5'-d-F-(TC)nT4(CT)n-Q 的設計，預期可降低目前定量PCR 探針所遇到在螢光背景值方面的困擾，進而提昇檢測靈敏度。同時將運用螢光核酸探針的特色，探討核酸三螺旋結構中Hoogsteen strand 的相對方向性。 III. 發展親和性高和抗酵素降解作用之寡核酸鏈試劑。設計與合成一系列位置-2' 經化學修飾的尿甘，並將之嵌入寡核酸鏈中進行物性測量與分析，探討夫喃糖構形對核酸三螺旋結構穩定度的影響和位置-2'取代修飾對抗酵素降解作用的效能。 IV. 開發核甘酸衍生物和螢光核酸探針的合成技術。將開發量產核甘酸衍生物的合成技術，並尋找新的螢光標誌分子，以固相合成法，有效、簡便地將螢光分子鍵結至寡核酸鏈上。
顯示於類別:	[化學系所] 研究計畫

文件中的檔案:

檔案	描述	大小	格式	瀏覽次數
942113M034.pdf		359Kb	Adobe PDF	521	檢視/開啟

在CCUR中所有的資料項目都受到原著作權保護.

資料載入中.....